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孕马血清 用法
作者:admin 发布日期:2018/4/24 11:44:53

孕马血清促性腺激素,即PMSG(Pregnant Mare Serum Gonadotropin)。也称为马绒毛膜促性腺激素。它是在怀孕母马血清中发现的一种激素。并已知在妊娠马属动物(驴、斑马等)都有产生,所以有人称为马属动物绒毛膜促性腺激素(eCG)。


(一)动物血清生产血清促性腺激素的来源及影响分泌量的因素


早在40年代,首次证实PMSG,是由妊娠母马的“子宫内膜杯状结构”所分泌。近年来研究进一步明确,这种杯状结构的主体,能分泌PMSG的双核细胞迅速侵入子宫内膜,内膜先形成皱壁,继这中央凹陷,边缘增高,增殖扩散形成腺状结构,一旦这些细胞胀大变成双核,即开始分泌PMSG。

影响PMSG分泌量的因素与妊娠时期、动物种类、个体和胎儿遗传型有关:①妊娠时期与PMSG在血液中出现,含量多少以及消失都有一定的规律,这种规律与子宫内膜杯的出现、增长和消失是一致的。母马于妊娠37~40天出现PMSG,55~75天时分泌量达高峰,以后下降,120~150天消失。②动物个体不同,分泌量有所差异。妊娠母马个体间PMSG的分泌量在每ml血清中可由10国际单位到250国际单位。分析原因是子宫内膜杯的数目丛不同,产生PMSG的多少也不同;怀双胎时比怀单胎产量增加1倍;体格大小不同,PMSG血中的相对浓度会有差异,轻型马比重型马浓度高;子宫内膜杯消失的快慢也是造成个体间差异的原因。③胎儿的遗传型,即胎儿的基因型不同,PMSG的产量不同。经研究证实,胎儿的遗传型是影响pMSG分泌量最突出的因子。驴怀骡分泌量最高,马怀马次之,马怀骡再次之,驴怀驴最低。


(二)孕马血清促性腺激素的化学特性


PMSG也是一种糖蛋白激素,其特点是含糖量高,约占41~45%,而且唾液酸含量多,因而形成了PMSG的酸性特点,故在血液中的半衰期可长达40—120小时。

PMSG分子与垂体促性腺激素一样,也是由α和β亚单位组成,而β亚单位是表现其活性的主要部分。其分子量为53000。由于分子不够稳定,高温、酸、碱条件都易引起失效,同时对它的分离提纯工作也较其他糖蛋白激素困难,但是目前通过研究其肽链的编码DNA,已经推出其α、β两亚基的氨基酸顺序。


(三)孕马血清促性腺激素的生理作用


1.PMSG具有类似FSH和LH的双重活性,但以FSH的作用为主,因此有着明显的促卵泡发育的作用,同时有一定的促排卵和黄体形成的功能。
2.对雄性动物具有促使精细管发育和性细胞分化的功能。
关于PMSG对妊娠母马本身的确切功能和生物学特性.至今还了解不够,尚待深入研究论证。


(四)孕马血清促性腺激素的应用


PMSG是一种经济实用的促性腺激素。在生产上常用以代替较昂贵的FSH而广泛应用于动物的诱发发情、超数排卵或增加排卵率(如提高双羔率);对卵巢发育不全或雄性生精能力衰退等也都可收到一定疗效。其应用方法和常用剂量列于表2—4。

应该提出的是,在实践中进行诱发发情或超数排卵处理时,发现动物个体对PMSG的反应性差异很大,有的个体甚至没有反应。其原因比较复杂,是否与个体生理状态不同,或者不同个体产生不同程度的免疫性反应所致,尚有待进一步探讨。关于PMSG与PG或hCG等其他激素合用,在胚胎移植中作超排处理的方法、剂量详见有关章节。


(五)孕马全血、孕马血清制备或提取孕马血清促性腺激素的方法


1.孕马全血的制备取500ml玻璃瓶,加入硼砂10g、硫代硫酸钠5g及蒸馏水30ml,在蒸锅中灭菌。冷却至体温时,采血500ml。在采血过程中,要摇晃瓶子,以防血液凝固。最后用灭菌翻口橡皮塞封好,放阴凉处备用。在普通冰箱内可保存1年以上。
2.孕马血清的制备选怀孕50-120天的健康母马,最好是轻型马,由颈静脉采血于灭菌、干燥的筒状容器内,于室温中使血液凝固,析出血清(为了得到更多的血清,可在凝固的血液上加上较重的物体)。最后吸出血清,加入0.5%石炭酸,保存于冷暗处,有效期可达1年左右。
3.PMSG的提纯选怀孕50—90天的的母马,用无菌手续采血,使自然凝固,分离血清,并加入0.5%石炭酸防腐,保存于4℃冰箱中备用。

提纯时,以偏磷酸沉淀蛋白,以苯甲酸吸附孕马促性腺激素,并以酒精加以沉淀。


动物血清生产


【作用与应用】在临床上的应用与FSH类似,主要用于诱导发情和超数排卵,并可用于治疗卵巢静止、持久黄体等症。

【用法与用量】诱导发情:孕马血清常用于皮下或肌内注射,每次400 - 750单位;超数排卵:600 -1 100单位。